ms-pcr法重新评估血管紧张素原基因m235t多态性与家庭性原发性高血压的相关性南京医科大学第一附属医院江苏省人民医院心研所心内科210029耿茜杨笛张寄南马文珠目的应用mspcr法检测血管紧张素原(agt)基因m235t多态性与家族性原发性高血压的相关性，并与传统的pcrrflp法进行比较。(4)具有高血压家族史的原发性高血压患者

ms-pcr法重新评估血管紧张素原基因m235t多态性与家庭性原发性高血压的相关性

南京医科大学第一附属医院江苏省人民医院心研所心内科210029

耿茜杨笛张寄南马文珠

目的应用mspcr法检测血管紧张素原(agt)基因m235t多态性与家族性原发性高血压的相关性，并与传统的pcrrflp法进行比较。

方法(1)采集外周血细胞提取基因组dna，建立pcrrflp最佳反应体系；利用3个引物建立ms?pcr扩增体系；同一标本分别以两种方法对比。(2)具高血压家族史者94例，无家族史者36例，2组中血压正常者和高血压患者分别是62、32、26、10例，所有标本采用mspcr法扩增。

结果(1)pcr?rflp最佳实验条件为0.075靏基因组dna扩增的pcr产物/30unit.tth111i酶，扩增产物长度为163bp，如存在变异位点则可被tth111i酶切成长度为140bp的条带。(2)应用ms?pcr法检测agt基因型，如为m等位基因纯合型(235mm)电泳示一条156bp的扩增片断；t等位基因纯合型(235tt)则示一134bp条带；m235t杂合型(235mt)则同时具有156bp和134bp两条片断。(3)10个标本分别以mspcr和pcr?rflp法检测，内切酶消化者基因型均为mt，而mspcr法仅1例为mt型，余9例均为tt型(90%)，dna测序结果证实为tt型。(4)具有高血压家族史的原发性高血压患者组(fh组)、具家族史的非高血压者(fnh组)、无家族史的正常对照组(n组)和无家族史的高血压患者组(nfh组)agt基因tt型频率分别为0.581、0.563、0.346和0.4，t等位基因频率分别为0.766、0.7656、0.577和0.55。